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農(nóng)藥殘留的經(jīng)典檢測(cè)技術(shù)與快速檢測(cè)

來(lái)源: 發(fā)布時(shí)間:2018-10-31

  導(dǎo)讀:據(jù)統(tǒng)計(jì),全國(guó)每年都有上百起因食用被農(nóng)藥污染的農(nóng)產(chǎn)品而引起的急性中毒事件,嚴(yán)重影響廣大消費(fèi)者身體健康。因此,完善農(nóng)藥殘留的檢測(cè)手段和防控農(nóng)藥殘留危害的工作刻不容緩。

    目前,大多數(shù)農(nóng)藥按照推薦劑量、施用方法、時(shí)間和次數(shù),農(nóng)副產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留量不會(huì)超過(guò)國(guó)家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn),不會(huì)產(chǎn)生危害性。但事實(shí)上農(nóng)藥殘留量超過(guò)國(guó)家規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)仍時(shí)有發(fā)生,主要原因是未按規(guī)定施藥,造成農(nóng)藥過(guò)量殘留;農(nóng)藥殘留量為農(nóng)藥原體及其有毒代謝物和雜質(zhì)的總殘留量,殘留的時(shí)間長(zhǎng);殘留農(nóng)藥可以通過(guò)食物鏈富集到農(nóng)畜產(chǎn)品中,如滴滴涕、我國(guó)早在1983年已停止對(duì)該產(chǎn)品的生產(chǎn)和使用,但過(guò)去殘留在環(huán)境中極微量的藥劑至今還通過(guò)食物鏈富集在畜禽體內(nèi)。
    農(nóng)殘檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)差距
    與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)相比,國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)無(wú)疑存在很大的差距,在數(shù)量、限量水平、標(biāo)準(zhǔn)分類(lèi)上都需要進(jìn)一步完善,如我國(guó)蔬菜農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)總指標(biāo)較少,以歐盟為例,殘留標(biāo)準(zhǔn)涉及農(nóng)藥76種,總計(jì)指標(biāo)583項(xiàng),我國(guó)蔬菜農(nóng)藥殘留標(biāo)準(zhǔn)只涉及52種農(nóng)藥,總計(jì)58項(xiàng),僅為歐盟標(biāo)準(zhǔn)的1/10。此外,我國(guó)蔬菜農(nóng)藥殘留指標(biāo)太籠統(tǒng),針對(duì)性不強(qiáng),百菜一標(biāo)的現(xiàn)象非常突出,我國(guó)缺少植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑和除草劑殘留指標(biāo)等等。
    農(nóng)殘經(jīng)典檢測(cè)技術(shù)
    氣相色譜法
    氣相色譜法是利用試樣中各組分在氣相和固定液一液相間的分配系數(shù)不同,當(dāng)汽化后的試樣被載氣帶人色譜柱中運(yùn)行時(shí),組分就在其中的兩相間進(jìn)行反復(fù)多次分配,經(jīng)過(guò)一定的柱長(zhǎng)后,便彼此分離,按順序離開(kāi)色譜柱進(jìn)人檢測(cè)器,產(chǎn)生的離子流信號(hào)經(jīng)放大后,在記錄器上描繪出各組分的色譜峰。
    氣相色譜法具有操作簡(jiǎn)單,分析速度快,分離效能高,靈敏度高,應(yīng)用范圍廣,可進(jìn)行多殘留分析等特點(diǎn),但一般不適用現(xiàn)場(chǎng)檢側(cè),沸點(diǎn)太高的物質(zhì)或熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)都難以應(yīng)用氣相色譜法進(jìn)行分析。
    氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法
氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用是將氣相色譜儀和質(zhì)譜儀串聯(lián)起來(lái)作為一個(gè)整體的檢測(cè)技術(shù)。樣本中的殘留農(nóng)藥通過(guò)氣相色譜分離后,對(duì)它們進(jìn)行質(zhì)譜的從低質(zhì)量數(shù)到高質(zhì)量數(shù)的全譜掃描。根據(jù)特征離子的質(zhì)荷比和質(zhì)量色譜圖的保留時(shí)間進(jìn)行定性分析,根據(jù)峰高或峰面積進(jìn)行定量,不但可將目標(biāo)化合物與干擾雜質(zhì)分開(kāi),而且可區(qū)分色譜柱無(wú)法分離或無(wú)法完全分離的樣品。
    高效液相色譜法
    高效液相色譜法也是一種傳統(tǒng)檢測(cè)方法,可以分離檢測(cè)極性強(qiáng)、分子量大的離子型農(nóng)藥,尤其適用于高沸點(diǎn)、熱穩(wěn)定性差、相對(duì)分子質(zhì)量大、不易氣化或受熱易分解農(nóng)藥的檢測(cè)。由于受熱易分解或失去活性的物質(zhì)不能直接使用或不適合用氣相色譜(GC)分析,從而推動(dòng)液相色譜技術(shù)的發(fā)展。
    液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法
    液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用是利用內(nèi)噴射式和粒子流式接口技術(shù)將液相色譜和質(zhì)譜聯(lián)接起來(lái)的方法。LC在分離方面非常有效,而MS允許分析物在痕量水平上進(jìn)行確認(rèn)和確證。LC-MS對(duì)簡(jiǎn)單樣品具有幾乎通用的多殘留分析能力,檢測(cè)靈敏度高,選擇性好,定性定量可同時(shí)進(jìn)行,結(jié)果可靠。主要用于分析熱不穩(wěn)定、分子量較大、難于用氣相色譜分析的樣品,是農(nóng)藥殘留分析中很有力的一種方法。
    由于高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用通過(guò)在常溫條件下實(shí)現(xiàn)擇品的分離,就可以得到質(zhì)譜鑒定所獲取的參數(shù),因此比氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)的應(yīng)用前景更為廣泛。
    超臨界流體色譜法
    超臨界流體色譜是以超臨界流體為流動(dòng)相的色譜分離檢測(cè)技術(shù),可以使用各種類(lèi)型的較長(zhǎng)色譜柱,可在較低溫度下分析分子量較大、對(duì)熱不穩(wěn)定和極性較強(qiáng)的化合物。
    超臨界流體(通常是co2)具有氣體和液體的雙重性質(zhì),粘度小、傳質(zhì)阻力小、擴(kuò)散速度快,分離能力和速度可與氣相色譜相比,而其
    密度、溶解力和速度又可與高效液相色譜相當(dāng),這對(duì)于在含有脂肪的食品中的農(nóng)藥殘留分析具有重要意義。
    SFC以超臨界流體為流動(dòng)相,對(duì)操作人員和環(huán)境無(wú)害,保留時(shí)間較短,工作溫度較低,適于分析中等極性、熱不穩(wěn)定性化合物,可以與大部分GC和HP優(yōu)的檢測(cè)器相連,極大地拓寬了其應(yīng)用范圍。
    快速檢測(cè)方法
    酶抑制檢測(cè)法應(yīng)用于檢測(cè)蔬菜、水果或農(nóng)產(chǎn)品中的有機(jī)磷類(lèi)和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留。其原理是將乙酰膽堿酯酶與蔬菜、水果或農(nóng)產(chǎn)品提取液混合,以碘化乙酰硫代膽堿(ATCHI)為底物,二硫雙硝基苯甲酸(DTNB)為顯色劑,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間的反應(yīng)后比色。如果提取液中不含農(nóng)藥或殘留量極低,酶的活性就不被抑制,基質(zhì)就會(huì)被水解,水解產(chǎn)物與加入的顯色劑產(chǎn)生顏色反應(yīng)。反之,加入的顯色劑就不顯顏色或顏色變化很小。
    免疫分析法(ImmunoassayAnalysis,IA)是利用抗原和相應(yīng)抗體在體外也能特異性結(jié)合的原理發(fā)展的一類(lèi)特異性強(qiáng)、靈敏度高、分析容量大、分析成本低、安全可靠的檢測(cè)方法[15]。是一種以抗體作為生物化學(xué)檢測(cè)器,對(duì)化合物、酶或蛋白質(zhì)等物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析,將免疫反應(yīng)與現(xiàn)代測(cè)試手段相結(jié)合而建立的超微量測(cè)定技術(shù)。由于抗體是專(zhuān)為抗原產(chǎn)生的,試驗(yàn)的專(zhuān)一性及親和力強(qiáng),因而方法靈敏度高,同時(shí)它對(duì)提取凈化的要求不是太高。
    酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)(ELISA)是免疫技術(shù)與現(xiàn)代測(cè)試手段相結(jié)合的一種超微量的測(cè)定技術(shù)。其原理是通過(guò)在合適的載體上,酶標(biāo)限定量的抗原與未知抗原競(jìng)爭(zhēng)固相抗體結(jié)合位點(diǎn),形成抗體復(fù)合物。在一定底物參與下,復(fù)合物上的酶催化底物使其水解氧化或還原成另一種帶色物質(zhì),由于酶的降解產(chǎn)物與顯色成正比,因此可通過(guò)酶標(biāo)儀來(lái)測(cè)定,從而確定是否存在未知抗原及其含量。
    生物傳感器是將傳感器技術(shù)與農(nóng)藥免疫分析技術(shù)相結(jié)合而建立起來(lái)的檢測(cè)方法。用固定化的生物體成分(酶、抗原、抗體等)或者生物體本身(細(xì)胞、微生物等)為敏感元件,再與適當(dāng)?shù)哪芰哭D(zhuǎn)換器結(jié)合而成器件。
    傳感器的生物敏感層與復(fù)雜樣品中特定的目標(biāo)分析物之間的識(shí)別反應(yīng)會(huì)產(chǎn)生一些物理化學(xué)信號(hào)的變化,這些變化通過(guò)不同原理的傳感器轉(zhuǎn)換成次級(jí)信號(hào)(通常為電信號(hào)),經(jīng)放大后顯示或記錄下來(lái),通過(guò)分析信號(hào)對(duì)待測(cè)物進(jìn)行定性和定量檢測(cè)。
    生物傳感器是將化學(xué)量轉(zhuǎn)化為其他可測(cè)量的物理量,是集生物化學(xué)、生物工程、電化學(xué)、材料科學(xué)和微型制造技術(shù)于一體。
    目前的研究方向集中在開(kāi)發(fā)新的檢測(cè)產(chǎn)品和技術(shù),努力使快速檢測(cè)向簡(jiǎn)便、快捷、靈敏度高的方向發(fā)展。
    一方面是將生物技術(shù)與現(xiàn)代化技術(shù)相結(jié)合,新的分析技術(shù)將涉及細(xì)胞化學(xué)、發(fā)酵化學(xué)、免疫化學(xué)和多肽排列結(jié)構(gòu)等多學(xué)科知識(shí)。例如,不斷完善的免疫芯片技術(shù),使農(nóng)藥殘留的快速、高通量檢測(cè)成為可能。
    另一方面加強(qiáng)農(nóng)藥殘留降解技術(shù)的研究。此外還積極開(kāi)發(fā)生產(chǎn)高效、低毒和易于降解的農(nóng)藥或生物農(nóng)藥,使農(nóng)藥殘留最大限度地減少。所有這些研究都預(yù)示著快速檢測(cè)技術(shù)將向新的高度推進(jìn)。

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